地微中心微地室万云洋和陈践发团队利用自主研发的核酸提取方法联合长庆油田分公司,对长庆油田单油井采出液进行菌群分析,较好的实验重复性表明该自主核酸提取方法对油藏采出液油相及水相微生物均具有较好的适用性,油水相中分别首次检出未知菌门,又体现了该方法对油水样本的特征性。
部分成果以论文《基于自主核酸提取方法分析单油井采出液微生物》在核心期刊《油气田环境保护》上发表(油气田环境保护,2022,32(2):16-22,http://www.yqthjbh.com/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=202202004&flag=1)。油藏采出液组分复杂,尤其是其中的油相,具有黏稠、浓黑、生物量低、特殊基因和试剂可及性差等特点,直接对油藏样本总的提取造成较大困难。特别是相关研究的不可重复性,已经成为油藏微生物多样性研究的一大难题。目前直接对原油微生物总提取报道极少,在为数不多的相关报道中大多只是使用通用的商业基因组试剂盒(针对环境样本设计)进行提取针对性不强。故而,该自主研发的核酸检测方法初步克服油藏采出液菌群原位分析的局限性。本团队基于自主研发的原油核酸提取方法,并首次通过分级膜滤方法,分析比较了长庆油田同一油井中油水相间微生物的差异,首次检出奇果热菌门(油相)及3候选菌门(候选醋热菌门(油相)、候选暗杆菌门(油相)和候选甘蔗菌门(水相)),比较了水相不同膜滤尺寸之间微生物多样性变化,结果表明该方法适用于对油水微生物多样性的分析,并对未知微生物和生物量相对较低的极端环境微生物仍具有一定的检出能力。论文得到了评审专家和主编的肯定评价。
此项工作持续得到了中石油战略合作科技专项(ZLZX2020010805,ZLZX2020020405);中国石油大学(北京)前瞻导向项目(ZX20190209);国家科技重大专项(2016ZX05050011,2016ZX05040002)的支持,得到了油气资源与探测国家重点实验室、非常规油气科学技术研究院、地层微生物资源与应用研究中心等单位的大力支持。本团队对原油核酸提取方法的研究始自2008年,田燕、穆红梅、洪宁、顾雪莹等十余名博士、硕士及本科生参与其中,其中熊驷骏同学坚持从本科到硕士对本项工作投入了全时研究,目前其已经进入到博士阶段。此项工作仍在持续优化中,旨在建立一套简便快捷、特异性和灵敏性双优且适宜油田现场现场使用的核酸提取和分析方法。
(来源:10.16.49.39:8080 微生物地质学实验室内网 发布时间:2022年4月25日)